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2022-613
WINSERA胎牛血清為什么要熱滅活血清?有必要做熱滅活嗎?加熱可以滅活血清中的補體系統(tǒng)，使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細胞和巨噬細胞，同時還能夠參與溶解細胞的過程。諸多研究表明大多數(shù)細胞的培養(yǎng)無須進行血清的熱滅活；而在免疫學研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養(yǎng)過程中，推薦使用熱滅活血清。實驗顯示，經(jīng)正確熱滅活處理的血清，對細胞的生長只有微小的促進或*沒有促進作用，而通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，造成細胞生長速...
查看更多2022-610
細胞生長逐漸變慢是什么原因？細胞增殖變慢有以下原因：1.消化過度2.傳代過密3.細胞營養(yǎng)不良4.細胞頻繁傳代5.細胞狀態(tài)不佳或老化6.細胞存在污染。培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時，細胞培養(yǎng)時應使用10%CO2；當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時，則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。CO2培養(yǎng)箱之水盤...
查看更多2022-610
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點，是污染嗎？首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染；如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則，是否運動，是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則，做布朗運動，黑點可能是細胞碎片（可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的），也可能是血清反復凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致，快速移動，很可能是細菌污染。如何預防細胞培養(yǎng)中黑點的產(chǎn)生?掌握細胞傳代的最佳時機，不要細胞長老了再...
查看更多2022-610
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。細胞抱團怎么處理？一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細...
查看更多2022-69
胎牛血清品質(zhì)的正確認識1）胎牛血清是品質(zhì)高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少；2）應取自剖腹產(chǎn)的胎牛，新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛；3）由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關(guān)注的一個問題，在保證質(zhì)量的前提下...
查看更多2022-66
ELISA試劑盒常見問題01問：看說明書里，如果樣本濃度高，可以不用稀釋，直接加原液。這個直接加血清原液，你們自己親自做過嗎？因為之前我們用別家的，他們說明書里，加樣是：10微升樣品加40微升樣品稀釋液。咨詢他們?nèi)绻绻麧舛雀?，可以加原液嗎？他們說可以，可能他們沒做過，說可以?？晌覀冏隽?，不可以。問他們，又說是可能離子濃度不夠。答：ELISA試劑盒檢測范圍是固定的，樣本是否稀釋是根據(jù)樣本實際濃度來選擇的，但前提條件樣本要落在檢測范圍內(nèi)，濃度高于檢測范圍，稀釋樣本達到檢測范圍內(nèi)...
查看更多2022-66
固體樣本處理問題01組織樣本操作流程：1、組織樣本必須保持鮮重，如果是凍存的組織，應該室溫平行2小時以上，然后用生理鹽水沖洗干凈，再用濾紙把周圍的水分吸干，稱重！組織重量不能低于50mg。2、組織勻漿液選取是PBS（PH=7.2-7.4，濃度為0.01mol/L）勻漿的比例為1:10，相當于1g組織加9ml的勻漿液。3、組織勻漿后，離心取上清，離心轉(zhuǎn)數(shù)為5000轉(zhuǎn)，但不能超過5000轉(zhuǎn)，時間為15分鐘。4、實驗中老師樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。02土壤樣...
查看更多2022-66
細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是是什么?如何處理?1.一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘??；(2)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長；(3)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可...
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