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千舍--熒光標(biāo)記的選擇指南

對(duì)于流式檢測(cè)最初的一步就是選擇何種方法，通常是何種熒光物質(zhì)標(biāo)記的抗體。廠家根據(jù)需要開發(fā)了各種熒光標(biāo)記的抗體，進(jìn)行選擇時(shí)首先要滿足的就是所選擇的抗體必須在流式上能夠檢測(cè)，各單位買的流式儀功能不*一致，首先要和檢測(cè)方進(jìn)行聯(lián)系，看能否檢測(cè)。在附表里我將常用的熒光標(biāo)記物質(zhì)的激發(fā)波長(zhǎng)和檢測(cè)波長(zhǎng)給出，可以參考。有幾個(gè)原則一起說一下：1、流式檢測(cè)時(shí)*熒光物質(zhì)直接標(biāo)記的抗體，如果沒有直接標(biāo)記的抗體，用間接發(fā)，即二抗上標(biāo)記熒光分子同樣可以。不過這增加了處理的難度，處理步驟增多，往往會(huì)不同程度影...

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免疫熒光單標(biāo)記和雙標(biāo)記的方法？及千舍熱賣細(xì)胞？

免疫熒光單標(biāo)記和雙標(biāo)記的方法1.免疫熒光單標(biāo)記方法免疫熒光單標(biāo)記是指只標(biāo)記一種蛋白質(zhì)分子，方法比較簡(jiǎn)單，只要按照染色步驟去做，通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇，固定液選擇的合適與否，可能會(huì)直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1)所需材料與試劑(1)培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達(dá)到60％一70％的細(xì)胞。(2)一抗、FITC或TRITC標(biāo)記的二抗。(3)4％多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液(一20℃預(yù)冷20min)。(4)封閉液。(5)0．01mol／LPBS緩沖液。...

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耐藥細(xì)胞株是如何構(gòu)建的？

目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法主要有以下幾種：大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因結(jié)合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細(xì)胞，等待細(xì)胞適應(yīng)低濃度的環(huán)境之后，再略微提高藥物濃度，繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)目前的環(huán)境，經(jīng)過反復(fù)的培養(yǎng)和加壓，最終使細(xì)胞可以在高濃度的藥物環(huán)境下生存②大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入超高藥物濃度的藥物，但是孵育的時(shí)...

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如何養(yǎng)出“漂亮“的懸浮細(xì)胞？

實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞種類可以大致分為貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞兩種，只有極少數(shù)類型細(xì)胞同時(shí)存在兩種狀態(tài)。懸浮細(xì)胞是指不需要依賴支持物，可在培養(yǎng)基中以懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)的一類細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞和大部分血液系統(tǒng)來源細(xì)胞。（如小鼠白血病細(xì)胞WEHI-3,人白血病細(xì)胞K-562,HL-60）。工業(yè)上也有越來越多的貼壁傳代細(xì)胞被馴化出來，進(jìn)行全懸浮的培養(yǎng)。目前在工業(yè)中應(yīng)用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293細(xì)胞等，它們主要用于重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)；在獸用生物制品中常用的傳代細(xì)胞主要有采用全懸...

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什么是細(xì)胞支原體污染？怎么辦？

支原體污染一直是細(xì)胞培養(yǎng)的“頭號(hào)敵人”，但是支原體的存在卻十分普遍，它的“不請(qǐng)自來”總是讓我們措手不及。世界上有近60%的實(shí)驗(yàn)室正在遭受支原體污染的困擾，今天就讓我們來好好認(rèn)識(shí)這個(gè)“刺頭”吧！什么是支原體？支原體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，具有高度多形性、無細(xì)胞壁、增殖緩慢、可在人工培養(yǎng)基中存活并增殖的特點(diǎn)。除此之外，它的“個(gè)頭”很小，只有0.1-0.3um，可通過一般的濾菌器。支原體主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成絲狀后斷裂呈球桿狀顆粒。大部分支原體繁殖速度比細(xì)菌慢，適宜生...

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炎炎夏日，細(xì)胞又污染了怎么辦？

一、單細(xì)菌污染?1.檢查操作人員的無菌操作技術(shù)；2.檢查相關(guān)培養(yǎng)基與試劑是否為操作者個(gè)人專用；3.檢查操作者的清潔情況：（a）培養(yǎng)操作前后是否洗手；（b）是否更換實(shí)驗(yàn)服；（c）是否扎好頭發(fā)；4、進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是否嚴(yán)格按照無菌要求佩戴實(shí)驗(yàn)服具（包括實(shí)驗(yàn)服、口罩、防塵帽、手套等）；5、若污染反復(fù)出現(xiàn)，問題往往出自使用試劑，需立即進(jìn)行檢查。二、支原體污染怎么辦?1、與其他操作者一起檢查支原體污染，確認(rèn)篩選步驟是否具有可操作性；2、確認(rèn)使用的血清是否為嚴(yán)格過濾，確保其質(zhì)量；3、外來細(xì)...

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如何構(gòu)建體外耐藥細(xì)胞

近年來，惡性腫瘤（癌癥）已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。為什么癌癥容易復(fù)發(fā)，很難治愈呢？因?yàn)榻^大部分抗腫瘤藥物，最終都逃不過腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的命運(yùn)，導(dǎo)致癌癥繼續(xù)發(fā)展。對(duì)于腫瘤細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生原因仍然處在研究之中，如何改善腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥依然是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。什么是耐藥性？化療是治療惡性腫瘤的方法中有效的手段之一，指用化學(xué)藥物的方法殺死腫瘤細(xì)胞。常用的藥物包括細(xì)胞增殖的抑制劑、DNA損傷修復(fù)途徑的抑制劑，如阿霉素（adriamycin）、紫杉醇（...

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WinSera胎牛血清搞活動(dòng)了

8月1日至9月30日，WinSera優(yōu)等胎牛血清的優(yōu)惠來襲，一次性購買多瓶有好禮相送，歡迎大家選購。活動(dòng)詳情請(qǐng)聯(lián)系千舍銷售~~胎牛血清的常見問題Q血清應(yīng)該如何保存，可以存放多久？A:血清可長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-20℃冰箱中。倘若把血清存放在4℃冰箱，請(qǐng)不要超過一個(gè)月。如果一次性無法用完一瓶血清，建議將血清無菌條件下分裝并儲(chǔ)存于-20℃，避免反復(fù)凍融。Q如何正確地解凍血清？A:采用逐步解凍法，將血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)入4℃冰箱融解，隨后分裝。切忌直接將血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)移至室溫解凍，這樣...

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