2022-811
血清保存方法1.如何保存血清?血清應該在-20℃保存。如果一次無法用完一瓶,應該無菌分裝后冷凍保存。注意避免反復凍融。2.為什么儲存在冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。凍融方法正確解凍方法:將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時,使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。注...
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2022-811
胎牛血清與新生牛血清、小牛血清區(qū)別1.血清類別牛血清類別胎齡胎牛血清(FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個月)新生牛血清(NCS)出生10日內(nèi)小牛血清(BCS)16-22周供體血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清:母牛懷孕3-8個月時,采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清:分別是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少;促細胞生長因子、促帖附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類血清4....
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2022-811
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用需要的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。一、在細胞培養(yǎng)過程中胎牛血清的好處胎牛血清給細胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個方面:1、提供細胞生長所需的天然激素或天然的生長因子。2、提供天然的結(jié)合蛋白,能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個鈣離子結(jié)...
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2022-811
對于細胞培養(yǎng)而言,胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清既是讓細胞快樂成長的需要營養(yǎng)物,又是可能導致細胞死亡的“原因”。辛苦養(yǎng)起來的細胞可能因為胎牛血清用錯而一切歸零……那么胎牛血清作為細胞培養(yǎng)最關(guān)鍵的原料之一,胎牛血清的質(zhì)量直接決定培養(yǎng)細胞的成敗,千舍生物為各科研人員推薦以下幾款血清:一、干細胞專用胎牛血清(低內(nèi)毒素FBS500-WE-002(ES))千舍生物嚴格控制胎牛血清的來源,做好檢驗檢疫與溯源等工作,心臟穿刺采血低溫分離,3次0.1μm無菌過濾,內(nèi)毒素≤3EU/ml,可...
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2022-83
原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數(shù)目即可換算出每mL細胞懸液中的細胞數(shù)量。操作步驟:1.將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上;2.輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出少許細胞懸液滴在細胞入口,使細胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間,靜置1-2min,使細胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細胞懸液進入旁邊的槽中;3.在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內(nèi)的細胞進行計數(shù),壓在大格四周邊線上的細胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細胞(如右側(cè)和下方...
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2022-83
一、貼壁細胞傳代(以一個T25瓶為例)1、吸出原培養(yǎng)液;2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄;3、加入1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞,放入培養(yǎng)箱消化;4、消化時間跟據(jù)細胞特性有所不同,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯分離變圓,側(cè)立培養(yǎng)瓶細胞可以滑落時可終止消化,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫落并在液體里反復吹打使細胞,使之盡量呈單顆細胞的懸浮液,這時可以在顯微鏡看下;6、收集細胞懸液離心,1...
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2022-83
1.實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉(zhuǎn)5-10min再開始實驗操作。2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應移出超凈臺,以利于空氣的流通;實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。3.每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。4.操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容...
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2022-83
有下列情況者,對血清內(nèi)毒素應格外留意篩選:1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒...
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