2022-83
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使...
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2022-82
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于空氣的流通;實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。3.每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。4.操作時(shí)小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容...
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2022-82
細(xì)胞培養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)這樣或那樣的問題,這些問題都是在細(xì)胞生長方面來說,比如細(xì)胞的不貼壁、生長緩慢、生長不好,甚至死亡的原因,這些問題使得細(xì)胞研究者很是頭疼,下面是針對這些問題的原因和解決方法:一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因:1.胰蛋白酶消化過度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法:1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;3...
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2022-82
一、貼壁細(xì)胞傳代(以一個(gè)T25瓶為例)1、吸出原培養(yǎng)液;2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;3、加入1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞,放入培養(yǎng)箱消化;4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯分離變圓,側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞,使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液,這時(shí)可以在顯微鏡看下;6、收集細(xì)胞懸液離心,1...
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2022-82
細(xì)胞一般儲存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲存時(shí)間是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。細(xì)胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細(xì)胞恢復(fù)到一般的生長狀態(tài),今天我們來看看原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟。一、檢查收到細(xì)胞株包裹時(shí),請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即處理告訴寄方。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng),或立即冷凍保存(置于–70°C,隔夜后,移到液氮罐保存)。二、冷凍細(xì)胞解凍方法一:1、準(zhǔn)備好37度水浴鍋,預(yù)熱至37度;2、準(zhǔn)備好T2...
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2022-82
★我們需要知道都有哪些種類的牛血清和它們的用途:1、透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。2、碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì),如某些激素、細(xì)胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證激素的作用效果。3、去外泌體血清適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。4、低IgG血清用于研究抗體、病毒...
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2022-725
科研人AB血清,現(xiàn)貨來襲人AB血清中缺少抗A、B血型抗原的抗體,常用于使免疫反應(yīng)降到。已經(jīng)證實(shí),人AB血清可以提高多數(shù)人來源細(xì)胞生長速率,并且使用濃度比混合型血清更低。適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制,是醫(yī)院、科研院校、動(dòng)物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。采用AB血型正常人血液為原料,經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。優(yōu)點(diǎn):人血清用于多種人細(xì)胞的培養(yǎng)效果很好,尤其是與人免疫系統(tǒng)相關(guān)的細(xì)胞培養(yǎng)。人血清還能作為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的補(bǔ)充成分、免疫組化染色的封閉劑以及HL...
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2022-714
1.血清沉淀是什么?血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白(絮狀沉淀)、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀)、膽固醇等。纖維蛋白(Fibrin)血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產(chǎn)過程中,血清采集、過濾(3次0.1μm過濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成,此時(shí)血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后,血清中纖維蛋白原往往會(huì)發(fā)生凝集,形成肉眼可見的沉淀。磷酸鈣...
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