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細(xì)胞凍存&細(xì)胞復(fù)蘇

03細(xì)胞凍存：試劑：凍存液，PBS，胰酶，含血清的培養(yǎng)基；流程：要凍存，先配置凍存液，凍存液包含了：DMSO：防止在低溫（零度以下至-196℃）保存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)液會(huì)形成冰晶，滲透壓會(huì)發(fā)生改變，細(xì)胞結(jié)構(gòu)會(huì)出現(xiàn)紊亂，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)損傷。凍存液制備時(shí)，一般需與血清一起配置：因?yàn)閮烧呋ト跁r(shí)，會(huì)散發(fā)熱量，所以凍存液需提前制備。因?yàn)榧?xì)胞太多了，需要凍存，所以要先看一看，吸一吸，洗一洗，分一分，中和一下，吹打制成細(xì)胞懸液，離心，吸掉上清液，加入凍存液，輕輕吹吸均勻，每管等量1ml裝入凍存...

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PAN胎牛血清的解凍正確方法

PAN胎牛血清的解凍正確方法胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題，在保證質(zhì)量的前提下，胎牛血清的正確存放與解凍的方法總結(jié)如下：1）胎牛血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則的搖晃均勻；2）長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下存儲(chǔ)血清，避免反復(fù)凍融。3）建議血清硬保存在-20℃條件下。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過1個(gè)月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝...

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如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?

如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?主要還是考慮無菌環(huán)境，盡量做好操作臺(tái)的滅菌，別把培養(yǎng)基滴落在生物安全柜的入風(fēng)口，別在培養(yǎng)箱里把培養(yǎng)基打翻。這兩個(gè)地方霉菌一旦滋生，那你就只能等著用甲醛熏蒸了。紫外無法殺滅霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。復(fù)蘇的時(shí)候，水浴鍋也需要進(jìn)行滅菌處理。一旦出現(xiàn)污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情況下，選擇扔掉。避免交叉感染，要不只能整個(gè)實(shí)驗(yàn)室消毒了。如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應(yīng)如何處理？原則上：直接滅菌后丟棄之。當(dāng)重要的培養(yǎng)...

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教你一眼判斷血清的質(zhì)量

教你一眼判斷血清的質(zhì)量淡黃色，透明——2小時(shí)以內(nèi)的國(guó)產(chǎn)新生牛血清，膽紅素含量較少；金黃色，透明——產(chǎn)下較長(zhǎng)時(shí)間的新生牛血清，一般超過2小時(shí)了；金黃色，不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清；淡黃色，帶一點(diǎn)微紅，透明——等級(jí)最高的進(jìn)口胎牛血清，如特級(jí)的北美；淡紅色，透明——普通的進(jìn)口胎牛血清；紅色偏深，透明——普通的進(jìn)口胎牛血清，南美的居多，采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn)；紅色偏暗，透明——普通胎牛血清，保存不好，血紅蛋白氧化了；紅色，不透明——進(jìn)口小牛血清，透明度越差，牛齡越大。

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科研小知識(shí)：每天都在使用，但你真的了解胎牛血清嗎？

胎牛血清是傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)過程中*的營(yíng)養(yǎng)組分，可以說選擇正確的胎牛血清直接決定試驗(yàn)和生產(chǎn)的結(jié)果。中國(guó)海關(guān)在其對(duì)有資質(zhì)進(jìn)行血清供應(yīng)的企業(yè)有明確的公示，有興趣的朋友可以查詢《允許向中國(guó)出口生物材料（包含血液制品）的國(guó)外企業(yè)單》。原料采集是胎牛血清整個(gè)生產(chǎn)工序中最關(guān)鍵的步驟，需要在各個(gè)血源地政府認(rèn)證的農(nóng)場(chǎng)采集，且確保采集對(duì)象為獸醫(yī)監(jiān)管下經(jīng)臨床檢查為健康的動(dòng)物。揭秘Gibco血清的那些事兒——原料采集篇以下視頻來源于賽默飛生命科學(xué)，時(shí)長(zhǎng)01:19賽默飛世爾科技有限公司是的生命科學(xué)原材料供...

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關(guān)于特級(jí)胎牛血清使用的方法

關(guān)于特級(jí)胎牛血清使用的方法進(jìn)口特級(jí)胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問題，1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請(qǐng)勿超過兩周，對(duì)于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中，由于血清解凍時(shí)體積會(huì)增加10％，必須預(yù)留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量，因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時(shí)→室溫下全溶后再...

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千舍精選推薦WinSera®特級(jí)胎牛血清

千舍精選推薦WinSera®特級(jí)胎牛血清1.WinSera®特級(jí)胎牛血清來源新西蘭，血源更優(yōu)秀，生產(chǎn)工藝更嚴(yán)格。每批胎牛血清均可提供完整的原產(chǎn)地證、質(zhì)檢報(bào)告及海關(guān)進(jìn)出口資質(zhì)，產(chǎn)品安全可追溯。2.具有極低的內(nèi)毒素（小于3EU/mL），蛋白含量適中，既能滿足細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)，又不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒害作用；此外，還對(duì)血清中微量元素及多種酶進(jìn)行了檢測(cè)，體現(xiàn)了產(chǎn)品檢測(cè)的全面性。3.千舍精選的WinSera®特級(jí)胎牛血清，經(jīng)過多種細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試，具有優(yōu)異的性能，更適合...

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胎牛血清注意事項(xiàng)

胎牛血清注意事項(xiàng)如果不能短期內(nèi)使用完畢，解凍后請(qǐng)適當(dāng)分裝。血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此在分裝血清時(shí)須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間，否則易導(dǎo)致分裝瓶?jī)隽讯l(fā)生污染。熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中需有規(guī)則地?fù)u晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補(bǔ)體(complement)。除非必須，一般不推薦對(duì)血清進(jìn)行熱處理。因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與的反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用、平滑肌細(xì)胞收縮、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺、增強(qiáng)吞噬作用、...

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